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作者：包葉江
單位：中國科學院大學附屬腫瘤醫院查驗科（浙江省腫瘤醫院查驗科）
血小板聚集會導致血小板計數假性減少，處理不當容易造成臨床誤診。EDTA依賴性血小板聚集（EDTA-PTCP）被研究得較多，其發生率約為0.07%-0.21%［1］。此外，由於抽血不當引起的血小板聚集也時有發生［2］。對於血小板聚集標本的處理流程如何？是否有自動化的解決方案？本文將對以上問題進行重點探討。
01
血小板聚集樣本的常見處理流程
血液樣本檢測時觸發血細胞分析儀的「血小板聚集」或「血小板降低」報警［3-4］，先推片染色後確認是否有血小板聚集存在：若血小板聚集在鏡下真實存在，可聯繫患者采血後立即檢測或更換抗凝劑（如枸椽酸鈉）後檢測並對結果進行抗凝劑體積校正［5］，若二次采血重測結果確認無血小板聚集，以二次采血重測結果為準發送報告。也有採用末梢血預稀釋法進行二次采血檢測［6］：吸取末梢血20μL添加到0.38 mL草酸銨稀釋液中，混勻後沖入計數池靜置15 min，顯微鏡下計數3次報告均值結果。
以上的處理流程均需要二次采血，操作不便，而且受患者依從性的影響。除了二次采血外，還有一些對聚集血小板的體外「解聚」方法，如在抽血後30min內加入阿米卡星（一種抗生素）有助於糾正EDTA依賴性血小板聚集的假性PLT降低［7］；此外也有研究表明，上機檢測前對標本進行預熱［8］或者震蕩［9］，可糾正部分血小板聚集導致的的假性PLT降低。
02
光學血小板（PLT-O）對聚集血小板的「自解聚」現象的案例報導
2019年我們團隊首次在自媒體上報導邁瑞BC-6800血液分析儀網織紅通道的光學血小板(PLT-O)可自動糾正血小板聚集導致的PLT假性減低。據廠家研發人員介紹，該儀器的RET通道對聚集血小板的「解聚」機制包括機內恒溫預熱、化學解聚劑和機內高速渦旋混勻。因為是機內自動進行「解聚」，所以簡稱「自解聚」［10］：
隨後廣州中山大學附屬第一醫院的鄧間開老師在自媒體上也報導了BC-6800 Plus血液分析儀的光學血小板(PLT-O)對聚集血小板的「自解聚」 功能［11］：
上海瑞金醫院的郭平老師在《瑞金血液》自媒體上也報導了BC-6800Plus血液分析儀的光學血小板(PLT-O)對聚集血小板的「自解聚」 功能［12］（CDR為BC-6800Plus 血液分析儀長進行的PLT-O檢測）：
03
光學血小板（PLT-O）對聚集血小板的「自解聚」功能分析
為驗證BC-6800光學血小板的「自解聚」功能，我們收集了30例正常對照和23例EDTA依賴性血小板聚集患者的外周血標本，其中23例血小板聚集標本均進行二次采血（更換為枸櫞酸鈉抗凝），且二次采血檢測時均未出現「聚集血小板」報警，鏡檢無血小板聚集。本文中23例血小板聚集標本的血小板真實值均按二次采血檢測的結果計算，相幹學術論文已發表［13］，簡要總結如下：
23例血小板聚集樣本首次檢測時BC-6800血液分析儀都提示「聚集血小板」報警，顯微鏡鏡下均可見聚集的血小板，但PLT-O結果即PLT-O（EDTA）顯著高於PLT-I（EDTA），與患者二次采血的PLT真實值即PLT-I（Citrate）接近，見下圖：
而30例無血小板聚集的正常對照樣本的PLT-O結果與PLT-I結果無顯著差異，見下圖：
且PLT-O散點圖上也無紅細胞碎片、白細胞碎片等物質的干擾，證明PLT-O對EDTA依賴性血小板聚集有「自解聚」作用。我們引入「解聚率」的概念定量這種「自解聚」作用，定義解聚率=血小板聚集標本PLT-O值/PLT真實值*100%，發現23例血小板聚集樣本中有22例樣本的解聚率大於80%，平均解聚率為93%。
04
光學血小板（PLT-O） 「自解聚」功能的應用
鑒於BC-6800光學血小板對EDTA依賴性血小板聚集的「自解聚」功能，通過與臨床科室關於PLT醫學決定水平的討論，我們重新設定復檢規則和復檢操作流程，從而降低血小板聚集導致假性血小板降低查驗報告發生的幾率並簡化後續操作流程，對於樣本存在血小板聚集，但PLT-O復檢結果在正常參考範圍內的結果，經血塗片鏡檢確認後報告PLT-O結果。
設置復檢規則「當儀器提示‘聚集血小板’報警並且血小板結果＜100×109/L時，自動開啟網織紅細胞通道（CDR）復檢PLT-O」並進行血塗片鏡檢，可解決90%以上EDTA依賴性血小板聚集導致的血小板計數假性減低的難題。對於極個別PLT-O「自解聚」不佳的血小板聚集標本（很可能標本放置時間太長或存在凝塊），通知患者進行更換抗凝劑二次采血檢測。此流程可顯著降低重新抽血的幾率，並杜絕了由於血小板聚集導致錯發報告的可能性，簡化血小板聚集樣本的復檢流程，明顯提升患者滿意度，並降低了醫療風險。
【參考文獻】
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[9]Gulati G L , Asselta A , Chen C . Using a Vortex To Disaggregate PlateletClumps[J]. Laboratory Medicine, 1997, 28(10):665-667.
[10]https://mp.weixin.qq.com/s/4jWQglTdf8pvUIoeg8rgUA
[11]https://mp.weixin.qq.com/s/FBqfHAp6PBpA9zxB3XLpXw[12]https://mp.weixin.qq.com/s/CRooJcDQIZZBZ-VkRmI97g
[13]Yejiang Bao, Jia Wang, Anjun Wang, et al.Correction of spurious low platelet counts by optical fluorescence plateletcounting of BC-6800 hematology analyzer in EDTA-dependent pseudothrombocytopenia patients. Transl Cancer Res 2020;9(1):166-172
編輯：小冉 審校：Rose